為何使(shi)用標(biao)記蛋(dan)白(bai)

 

    ①如(ru)果(guo)開放閱(yue)讀框(kuang)已經被克隆(long)化(hua)，但(dan)是由(you)於(yu)蛋白(bai)是新發現(xian)的(de)，或者由(you)於蛋(dan)白(bai)免(mian)疫原性較(jiao)弱，  目(mu)前尚沒(mei)有針(zhen)對該(gai)蛋(dan)白(bai)產物的(de)抗體(ti)時(shi)，此標(biao)記技(ji)術具(ju)有重(zhong)要的(de)應用(yong)價值。隨著(zhe)基因(yin)組的(de)研究，由(you)基因(yin)工(gong)程進入蛋白(bai)工程(cheng)，標(biao)記技(ji)術顯(xian)得越(yue)來(lai)越(yue)重(zhong)要。

 

    ②由(you)於(yu)標(biao)記物不(bu)是天(tian)然蛋(dan)白(bai)氨(an)基酸(suan)序列(lie)的(de)固有部分(fen)，與(yu)標(biao)記物結合(he)的(de)試劑(ji)在(zai)進行蛋白(bai)提純(chun)過(guo)程中(zhong)，對蛋白(bai)功能(neng)產生(sheng)影(ying)響的(de)可(ke)能性(xing)較(jiao)小。

 

    ③只要具(ju)備(bei)適(shi)當(dang)的(de)載體(ti)，標(biao)記蛋(dan)白(bai)可(ke)在(zai)任(ren)何細(xi)胞中進行表(biao)達；例(li)如(ru)，相(xiang)同的(de)標(biao)記蛋(dan)白(bai)既可(ke)在(zai)細(xi)菌中表(biao)達，又可(ke)在(zai)昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞系統(tong)中(zhong)表(biao)達。

 

    ④標(biao)記物的(de)定位特性以(yi)及與(yu)其(qi)他分(fen)子的(de)相(xiang)互(hu)作(zuo)用，可(ke)通過(guo)穩定轉染(ran)細(xi)胞中的(de)表(biao)達進行監(jian)測。標(biao)記物用於細胞染(ran)色(se)和(he)免(mian)疫印(yin)跡(ji)中(zhong)檢(jian)測蛋白(bai)，對區(qu)分(fen)內(nei)源性(xing)的(de)未標(biao)記蛋(dan)白(bai)和(he)外源性蛋白(bai)效果(guo)較(jiao)好(hao)。

 

    ⑤標(biao)記物可(ke)用於(yu)免(mian)疫沈(chen)澱(dian)試驗，由於(yu)抗標(biao)記物抗體(ti)的(de)高(gao)度(du)特異性(xing)，可(ke)以檢(jian)測結合(he)在(zai)標(biao)記蛋(dan)白(bai)上的(de)其(qi)他感(gan)興趣(qu)的(de)目(mu)的(de)蛋白(bai)。

 

    ⑥標(biao)記技(ji)術可(ke)用於(yu)純(chun)化(hua)表(biao)達的(de)蛋白(bai)，其(qi)特點是由(you)於(yu)洗(xi)脫(tuo)方(fang)法(fa)非(fei)常溫和(he)，可(ke)以純(chun)化(hua)活(huo)性(xing)蛋(dan)白(bai)或蛋白(bai)復合物。

 

    ⑦因(yin)為(wei)每個(ge)標(biao)記物是*的(de)，有可(ke)能在(zai)同壹(yi)細(xi)胞表(biao)達系統(tong)中(zhong)同時(shi)表(biao)達多(duo)種(zhong)標(biao)記物以研究蛋(dan)白(bai)質(zhi)之間(jian)的(de)相(xiang)互(hu)作(zuo)用或進行共(gong)定位(colocalization)。也(ye)可(ke)以使(shi)用多(duo)種(zhong)標(biao)記物對同壹(yi)蛋(dan)白(bai)或蛋白(bai)復合物進行純化(hua)，如(ru)按(an)順序地使(shi)用2種(zhong)標(biao)記物純化(hua)蛋(dan)白(bai)質(zhi)時(shi)，可(ke)取得較(jiao)好(hao)的(de)效果(guo)。

 

    隨著(zhe)標(biao)記物技術的(de)廣泛(fan)應用(yong)，已出現(xian)了範(fan)圍(wei)越(yue)來(lai)越(yue)廣泛(fan)的(de)商品化(hua)產品，極大地(di)推(tui)動了(le)該(gai)技術(shu)的(de)發展(zhan)。表(biao)位作(zuo)圖和(he)新的(de)標(biao)誌蛋白(bai)以及蛋白(bai)和(he)配(pei)體(ti)相(xiang)互(hu)作(zuo)用研究的(de)成(cheng)功，導致(zhi)了大量(liang)新的(de)標(biao)記系統(tong)不(bu)斷出現(xian)，然而(er)目(mu)前還沒(mei)有適(shi)用(yong)於各(ge)種(zhong)研究所(suo)需的(de)標(biao)記物。在(zai)某(mou)些(xie)研究工(gong)作(zuo)中(zhong)，有必要使(shi)用多(duo)種(zhong)不(bu)同的(de)標(biao)記物，以證(zheng)明標(biao)記物是否(fou)對(dui)蛋白(bai)活性(xing)產生(sheng)影(ying)響。

 

    DNA重(zhong)組標(biao)記技(ji)術的(de)兩種(zhong)主要用(yong)途(tu)是蛋(dan)白(bai)檢(jian)測和(he)蛋白(bai)純化(hua)，但(dan)兩種(zhong)應用(yong)目(mu)的(de)對標(biao)記物的(de)特性要求(qiu)不(bu)同。雖(sui)然大(da)多(duo)標(biao)記物可(ke)用於(yu)蛋(dan)白(bai)的(de)檢(jian)測和(he)蛋白(bai)純化(hua)，但(dan)是某(mou)些(xie)標(biao)記物只適(shi)用(yong)於其(qi)中(zhong)之壹。