
所(suo)謂(wei)Real-Time PCR技(ji)術,是指在PCR反(fan)應(ying)體系(xi)中加入熒(ying)光(guang)基團(tuan),利(li)用熒(ying)光(guang)信號(hao)累(lei)積實時監測整(zheng)個(ge)PCR進程(cheng),zui後(hou)通(tong)過(guo)標(biao)準曲線對(dui)未(wei)知(zhi)模板(ban)進(jin)行定(ding)量(liang)分析(xi)的(de)方(fang)法。利(li)用熒(ying)光(guang)信號(hao)的(de)變化(hua)實(shi)時檢(jian)測PCR擴增反應中(zhong)每壹(yi)個(ge)循(xun)環擴增產物量(liang)的(de)變化(hua),通(tong)過(guo)Ct值(zhi)和(he)標準曲線的(de)分(fen)析(xi)對(dui)起(qi)始(shi)模板進(jin)行定(ding)量(liang)分析(xi)。real-time PCR技(ji)術即實(shi)時熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR避免了傳(chuan)統PCR以(yi)終(zhong)產物監測定(ding)量(liang)產生的(de)偏(pian)差,提高(gao)實驗(yan)的(de)重(zhong)復(fu)性(xing)。該技(ji)術已(yi)經被(bei)廣泛(fan)用於(yu)監測細胞(bao)mRNA表達量(liang)的(de)變化(hua);比(bi)較不(bu)同組(zu)織的(de)mRNA表(biao)達差(cha)異;驗證(zheng)基因(yin)芯(xin)片,siRNA幹擾(rao)的(de)實(shi)驗結果(guo)。
Real-Time PCR操作(zuo)流(liu)程(cheng)

Real-Time PCR操作(zuo)流(liu)程(cheng) - 根據(ju)已(yi)知(zhi)全(quan)長基因(yin)序列及待(dai)檢(jian)基因(yin)的(de)背(bei)景(jing)信息,設計(ji)並合(he)成(cheng)Realtime PCR引物
- RNA抽提:提供(gong)組(zu)織(zhi)、細胞(bao)等(deng)來源樣(yang)本的(de)RNA抽(chou)提服務,並(bing)將RNA反轉錄為cDNA
- 制備(bei)標準曲線樣(yang)品(pin)
- 標(biao)準曲線樣(yang)品(pin)和(he)待(dai)測樣(yang)品(pin)分(fen)別加入到(dao)含SG的(de)RealTime PCR反(fan)應液中,進行RealTime PCR擴增和(he)檢(jian)測
- 檢(jian)測結果(guo)進行標準曲線分(fen)析(xi)
- 提供(gong)實(shi)驗(yan)報(bao)告:包括(kuo)詳細的(de)實(shi)驗方(fang)法及實時熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR實驗結果(guo)的(de)相(xiang)關圖表(biao)。