脫(tuo)氧核糖核酸酶 I 來源(yuan)於牛(niu)胰(yi)腺
Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
DNAse I可用(yong)於切(qie)開DNA，作為(wei)將標記堿(jian)基(ji)插入(ru)DNA的(de)第壹步(bu)。來自sigma的(de)該(gai)酶已(yi)用(yong)於處理(li)大鼠的(de)腦(nao)組(zu)織。該(gai)研究(jiu)表(biao)明星(xing)形膠(jiao)質(zhi)細胞的(de)軸突生(sheng)長不受(shou)少突(tu)膠(jiao)質細(xi)胞(bao)抑制(zhi)。
[1]在(zai)另壹項研究(jiu)中(zhong)，
大腸(chang)桿(gan)菌的(de)解(jie)凍(dong)固(gu)定樣本被來自Sigma的(de)DNAseI以(yi)及(ji)其他(ta)酶進行(xing)消化。消化是(shi)在(zai)進行(xing)通透化處理(li)和核酸染(ran)色(se)前完(wan)成(cheng)的(de)。
[2]來自牛(niu)胰(yi)腺的(de)脫(tuo)氧核糖核酸酶I已(yi)用(yong)於研(yan)究(jiu)枯(ku)草(cao)芽(ya)孢桿菌中核酸酶的(de)二維(wei)酶譜(pu)分析(xi)。來自牛(niu)胰(yi)腺的(de)脫(tuo)氧核糖核酸酶I還用(yong)於研(yan)究(jiu)小溝(gou)和大溝(gou)結合(he)藥(yao)物(wu)和嵌(qian)入(ru)劑對(dui)小溝(gou)結合(he)蛋(dan)白RecA和(he)脫(tuo)氧核糖核酸酶I的(de)DNA結合(he)的(de)影(ying)響(xiang)。
用(yong)於從(cong)蛋(dan)白質(zhi)樣(yang)品中除去(qu) DNA。
生(sheng)化/生(sheng)理(li)作用(yong)
DNase I是(shi)壹種內切(qie)核酸酶，可作(zuo)用(yong)於與嘧(mi)啶(ding)相(xiang)鄰的(de)磷(lin)酸二酯鍵(jian)以(yi)產生(sheng)具(ju)有(you)末端5′-磷(lin)酸的(de)聚核苷酸。當(dang)Mg
2+存(cun)在(zai)時(shi)，DNAse I可獨立切(qie)割(ge)DNA的(de)每條鏈且切(qie)割(ge)位(wei)點(dian)是(shi)隨(sui)機(ji)的(de)。當(dang)Mn
2+存(cun)在(zai)時(shi)，兩條DNA鏈都幾(ji)乎是(shi)在(zai)同(tong)樣(yang)的(de)位(wei)置(zhi)被切(qie)割(ge)。
[3]最(zui)適(shi)pH在(zai)7-8之(zhi)間(jian)。二價(jia)陽(yang)離(li)子如Mn
2+, Ca
2+, Co
2+以及(ji)Zn
2+都(dou)是(shi)酶的(de)激活劑。
[4]5 mM濃度(du)的(de)Ca
2+可穩定(ding)酶免收蛋(dan)白水(shui)解酶的(de)消化。來自牛(niu)胰(yi)腺的(de)DNAse I由(you)四(si)種(zhong)色(se)譜可區(qu)分的(de)組(zu)分A，B，C和(he)D組(zu)成(cheng)，它們的(de)摩(mo)爾(er)比為(wei)4:1:1。僅有(you)少量(liang)的(de)D被發(fa)現(xian)。螯合(he)劑、十二烷基(ji)硫(liu)酸鈉(na)（SDS）
[6]和(he)肌(ji)動蛋(dan)白
[7]都(dou)已(yi)知可抑制(zhi)酶的(de)活(huo)性。
單位(wei)定義(yi)
壹(yi)Kunitz單(dan)位(wei)的(de)酶在(zai)以(yi)I型(xing)或III型DNA作(zuo)為(wei)底物(wu)時(shi)，在(zai) pH 5.0，37°C的(de)條件下(xia)在(zai)每mL中每分鐘可引(yin)起(qi)0.001的(de)A260。
外(wai)形
含(han)氯(lv)化鈣(gai)的(de)凍(dong)幹(gan)粉
制(zhi)備(bei)說(shuo)明
溶(rong)液0.15 M NaCl的(de)10 mg/mL DNAse I溶(rong)液分裝(zhuang)保(bao)存(cun)在(zai)−20 °C壹(yi)周(zhou)後可能(neng)會丟失(shi)<10%的(de)活(huo)性。同(tong)樣(yang)的(de)溶(rong)液保(bao)存(cun)在(zai)2-8 °C則(ze)可能(neng)丟(diu)失(shi)約(yue)20%的(de)活(huo)性。當在(zai)pH 5和(he)7之(zhi)間(jian)時(shi)，它可在(zai)60 °C維(wei)持活性最長(chang)達五(wu)小時(shi)，並在(zai)68 °C <10分鐘內(nei)丟(diu)失(shi)活(huo)性。它在(zai)乙(yi)酸緩沖液(ye)（pH 5.0）和tris緩沖液(ye)((pH 7.2)，1 mg/mL濃度(du))中(zhong)以(yi)6%/小時(shi)的(de)速率丟失(shi)活(huo)性。
分析(xi)說明
蛋(dan)白由(you)雙(shuang)縮(suo)脲法測(ce)定。
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