sydlabs：核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei) A 溶液

sydlabs：核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei) A 溶液

核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei) A (RNase A) 的用(yong)途(tu)是(shi)什(shen)麽(me)？除了 RNA 序(xu)列(lie)分析(xi)和 RNase 保(bao)護(hu)測(ce)定(ding)之外(wai)，RNase A 還(hai)常(chang)用(yong)於(yu)質(zhi)粒(li)和基因組 DNA 純化以及(ji)蛋白(bai)質提(ti)取(qu)過程。

胰(yi)腺(xian)核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei)是(shi)壹(yi)種分泌(mi)酶(mei)，屬於(yu)胰(yi)腺(xian)核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei)家族。 RNase A 是(shi)壹(yi)種核(he)酸(suan)內切(qie)酶(mei)，可(ke)裂解(jie)嘧啶堿基 3' 側的(de)內(nei)部(bu)磷酸二(er)酯(zhi) RNA 鍵(jian)。 RNase A 更(geng)喜歡以聚 (C) 作為底物(wu)並(bing)水(shui)解(jie) 2',3'-環狀(zhuang)核(he)苷(gan)酸。 RNase A 作用(yong)於(yu)單鏈和雙鏈 RNA。

MB120：RNase A 溶液

重組核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei) A (RNase A) 是(shi)由(you)酵母細胞產(chan)生的(de)，帶有編(bian)碼(ma)基因工(gong)程牛胰(yi)腺(xian)核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei)的克(ke)隆(long)基因。
CAS 號(hao)：9001-99-4。
歐共體：3.1.27.5。
分子(zi)量(liang)：13.7 kDa。
等電點(dian)：9.6。
pH範(fan)圍(wei)：6-10；在(zai)pH 7.6-8.0範(fan)圍(wei)內(nei)具(ju)有(you)高(gao)活(huo)性(xing)。
單位定(ding)義(yi)：當(dang)酵母 RNA 在 37°C、pH 5.0 下水(shui)解(jie)時(shi)，1 個單位的 RNase A 酶(mei)會導(dao)致(zhi) 260 nm 處的吸光(guang)度(du)增(zeng)加(jia) 1.0 個單位。五十(shi)個(ge)單位大(da)約(yue)相(xiang)當(dang)於(yu) 1 個(ge)庫(ku)尼茨單位。
比活(huo)性(xing)：≥ 40 Kunitz 單位/毫克(ke)蛋(dan)白(bai)質。
溫(wen)度曲(qu)線(xian)：建議溫度(du)範(fan)圍(wei)15-70°C； 60°C 時(shi)具有(you)很(hen)大(da)活(huo)性(xing)。
消(xiao)光(guang)系(xi)數：E ^1%  =7.1； 280納米。
純度：>95%（通過(guo)還(hai)原(yuan) SDS-PAGE）。每(mei)批(pi) RNase A（溶液和粉末）均(jun)經過(guo)測(ce)試(shi)，以確保不(bu)含蛋白(bai)酶(mei)、核(he)酸(suan)內切(qie)酶(mei)、核(he)酸(suan)外(wai)切(qie)酶(mei)、DNase 和 DNA。使用(yong)前(qian)無需加(jia)熱。在 40 µg 蛋(dan)白酶(mei) K 與 1 ug λ DNA 在(zai) 37°C 下孵育(yu) 6 小時(shi)的質(zhi)量(liang)控制(zhi)程序(xu)中(zhong)未檢測(ce)到(dao) DNase。該(gai)制(zhi)劑被(bei)認為不(bu)含 DNase。
劑型(xing)：溶液。
溶液制(zhi)備：要(yao)制(zhi)備 10 mg/mL RNase A 庫(ku)存溶液，請將 10 mg RNase A 溶解(jie)在 1 mL 緩沖(chong)液中：10 mM Tris-HCl、15 mM NaCl，pH 7.5。
根(gen)據應(ying)用(yong)，推(tui)薦的 RNase A 濃(nong)度(du)為 1 至 100 µg/mL。要(yao)從質(zhi)粒(li)制(zhi)備物(wu)中(zhong)去(qu)除 RNA，請使用(yong) 10 μg/ml 工(gong)作溶液並在(zai)室(shi)溫下(xia)孵育(yu)樣品(pin) 1 小時(shi)。為了制(zhi)備雙鏈 cDNA 的(de)“平(ping)端(duan)"，請使用(yong) 100 ng/ml 工(gong)作溶液。
活(huo)化劑：鉀鹽和鈉(na)鹽。該(gai)酶(mei)在多(duo)種反應條(tiao)件(jian)下都具有(you)活(huo)性(xing)。在(zai)低(di)鹽濃(nong)度(du)（0 至 100 mM NaCl）下(xia)，RNase A 切(qie)割(ge)單鏈和雙鏈 RNA 以(yi)及(ji) RNA-DNA 雜交體中的 RNA 鏈。然而，當 NaCl 濃(nong)度為 0.3 M 或(huo)更高(gao)時(shi)，RNase A 會特異(yi)性(xing)切(qie)割(ge)單鏈 RNA。
抑(yi)制(zhi)劑：通過(guo) His 12 和 His 119 的(de)烷基化。RNase A 對玻璃表面(mian)具有(you)高(gao)親(qin)和力(li)。在(zai)中性(xing) pH 值(zhi)和高(gao)濃(nong)度 (>10 mg/ml) 下(xia)，酶(mei)會沈澱。該酶(mei)受(shou)到(dao)焦(jiao)碳(tan)酸(suan)二乙酯(zhi) (DEPC)、胍(gua)鹽 (4 M GuSCN)、β-巰(qiu)基乙醇(chun)、重(zhong)金(jin)屬(shu)和 RNase 抑(yi)制(zhi)劑（如(ru) RIBOPROTECT (RT33)）的抑(yi)制(zhi)。為了從樣品(pin)中(zhong)去(qu)除酶(mei)，請使用(yong)旋(xuan)轉(zhuan)柱或(huo)多(duo)次(ci)苯(ben)酚(fen)/氯(lv)仿萃取(qu)進行分離(li)。

運輸(shu)：重組 RNase A 溶液用(yong)冰(bing)袋(dai)運輸(shu)。收到(dao)後(hou)，立(li)即將其存(cun)放(fang)在(zai)下面(mian)建議(yi)的(de)溫度下。
穩(wen)定(ding)性(xing)和儲(chu)存(cun)：
使用(yong)手(shou)動除霜冰(bing)箱(xiang)並避(bi)免(mian)重(zhong)復(fu)凍(dong)融(rong)循(xun)環(huan)。
如果(guo)儲存(cun)在 -20 至 -70°C 下(xia)，自(zi)收到(dao)之(zhi)日起(qi) 24 個月(yue)。
如果(guo)儲存(cun)在 2–8°C，則自(zi)收到(dao)之(zhi)日起(qi) 12 個月(yue)。
如果(guo)儲存(cun)在 -20 至 -70°C 下(xia)，重(zhong)構後(hou)可(ke)保存 12 個(ge)月(yue)。

sydlabs：核(he)糖(tang)核(he)酸(suan)酶(mei) A 溶液