透(tou)析袋,什(shen)麽是透(tou)析袋

　　自(zi)Thomas Graham 1861年發(fa)明(ming)透(tou)析方(fang)法(fa)至今(jin)已有(you)壹百(bai)多年。透(tou)析已成為生(sheng)物化學實(shi)驗室zui簡(jian)便zui常(chang)用的(de)分離(li)純(chun)化(hua)技(ji)術之(zhi)壹。在(zai)生(sheng)物大(da)分子的制備過(guo)程中(zhong)，除(chu)鹽、除(chu)少量有(you)機(ji)溶劑、除(chu)去生(sheng)物小(xiao)分子雜(za)質和(he)濃縮(suo)樣(yang)品等(deng)都要(yao)用到(dao)透(tou)析的技術。　　透(tou)析只需要(yao)使用的(de)半透(tou)膜即可(ke)完(wan)成。通常(chang)是將(jiang)半(ban)透(tou)膜制成袋狀，將(jiang)生(sheng)物大(da)分子樣品溶液置(zhi)入袋內，將(jiang)此(ci)透(tou)析袋浸(jin)入水(shui)或(huo)緩沖(chong)液中(zhong)，樣品溶液中(zhong)的大(da)分子量的生(sheng)物大(da)分子被截留在(zai)袋內，而(er)鹽(yan)和(he)小(xiao)分子物質不(bu)斷(duan)擴(kuo)散透(tou)析到袋外，直到袋內外兩(liang)邊的(de)濃度達(da)到(dao)平衡(heng)為(wei)止(zhi)。保(bao)留在(zai)透(tou)析袋內未透(tou)析出的樣品溶液稱(cheng)為“保留液”，袋（膜）外的(de)溶液稱(cheng)為“滲出液”或(huo)“透(tou)析液”。　　透(tou)析的動力是擴(kuo)散壓，擴(kuo)散壓是由(you)橫(heng)跨膜(mo)兩(liang)邊的(de)濃度梯度形成(cheng)的(de)。透(tou)析的速度反比於膜的厚度，正(zheng)比於欲透(tou)析的小(xiao)分子溶質在(zai)膜內(nei)外兩(liang)邊的(de)濃度梯度，還正(zheng)比於膜的面積(ji)和(he)溫度，通常(chang)是4℃透(tou)析，升(sheng)高溫度可(ke)加(jia)快透(tou)析速度。　　透(tou)析膜可(ke)用動物膜和(he)玻璃紙等(deng)，但用的(de)zui多的還(hai)是用纖維素(su)制(zhi)成(cheng)的(de)透(tou)析膜，目(mu)前(qian)常(chang)用的(de)是美(mei)國SPECTRUM公司生(sheng)產的各種(zhong)尺寸(cun)的(de)透(tou)析管，截留分子量MwCO（即留在(zai)透(tou)析袋內的(de)生(sheng)物大(da)分子的zui小(xiao)分子量，縮寫(xie)為MwCO）通常(chang)為1萬(wan)左(zuo)右。　　商品透(tou)析袋制成(cheng)管(guan)狀(zhuang)，其(qi)扁(bian)平寬度為23 mm～50 mm不(bu)等(deng)。為防(fang)幹裂(lie)，出廠(chang)時(shi)都用10％的(de)甘油處理過(guo)，並含(han)有(you)極(ji)微(wei)量(liang)的(de)硫化(hua)物、重(zhong)金(jin)屬和(he)壹些(xie)具有(you)紫(zi)外吸(xi)收(shou)的雜(za)質，它(ta)們對(dui)蛋(dan)白(bai)質和(he)其(qi)它(ta)生(sheng)物活性物質有(you)害(hai)，用前(qian)必須除(chu)去。可(ke)先(xian)用50％乙(yi)醇煮沸(fei)1小(xiao)時(shi)，再(zai)依(yi)次用50％乙(yi)醇、0.01 mol/L碳(tan)酸氫(qing)鈉和(he)0.001 mol/L EDTA溶液洗滌，zui後(hou)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)沖洗即可(ke)使(shi)用。實(shi)驗證明，50％乙(yi)醇(chun)處理對(dui)除(chu)去具有(you)紫(zi)外吸(xi)收(shou)的雜(za)質特(te)別有(you)效。使用後(hou)的透(tou)析袋洗凈後可(ke)存(cun)於4℃蒸餾(liu)水(shui)中(zhong)，若長時(shi)間不(bu)用，可(ke)加(jia)少量NaN3，以防(fang)長菌。洗凈涼(liang)幹的透(tou)析袋彎折(zhe)時(shi)易裂(lie)口(kou)，用時(shi)必須仔細檢(jian)查(zha)，不(bu)漏(lou)時(shi)方(fang)可(ke)重(zhong)復使(shi)用。　　新透(tou)析袋如不(bu)作(zuo)如上(shang)的特(te)殊(shu)處理，則可(ke)用沸(fei)水(shui)煮五至十(shi)分鐘(zhong)，再(zai)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)洗凈，即可(ke)使(shi)用。使(shi)用時(shi)，壹端用橡皮筋或(huo)線繩(sheng)紮緊(jin)，也(ye)可(ke)以使用特(te)制的透(tou)析袋夾夾(jia)緊(jin)，由(you)另(ling)壹端灌(guan)滿(man)水，用手(shou)指稍加壓，檢查(zha)不(bu)漏(lou)，方(fang)可(ke)裝(zhuang)入待透(tou)析液，通常(chang)要(yao)留三分之(zhi)壹至壹半(ban)的(de)空間，以防(fang)透(tou)析過(guo)程中(zhong)，透(tou)析的小(xiao)分子量較(jiao)大(da)時(shi)，袋外的(de)水(shui)和(he)緩(huan)沖液過(guo)量進入袋內將(jiang)袋漲破(po)。含(han)鹽量很高的蛋白(bai)質溶液透(tou)析過(guo)夜時(shi)，體積(ji)增(zeng)加(jia)50％是正(zheng)常(chang)的。為(wei)了(le)加快透(tou)析速度，除(chu)多次更(geng)換透(tou)析液外，還(hai)可(ke)使(shi)用磁子攪拌。透(tou)析的容器(qi)要(yao)大(da)壹些(xie)，可(ke)以使用大(da)燒(shao)杯(bei)、大(da)量(liang)筒(tong)和(he)塑(su)料(liao)桶(tong)。小(xiao)量(liang)體積溶液的(de)透(tou)析，可(ke)在(zai)袋內放(fang)壹截兩(liang)頭(tou)燒(shao)園(yuan)的(de)玻璃棒(bang)或(huo)兩(liang)端封口(kou)的玻璃管，以使透(tou)析袋沈入液面以下(xia)。　　檢(jian)查(zha)透(tou)析效果的方(fang)法(fa)是：用1％ BaCl2檢(jian)查(zha)（NH4）2SO4，用1％ AgNO3 檢(jian)查(zha)NaCl、KCl等(deng)。　　為了(le)提高透(tou)析效率，還可(ke)以使用各種(zhong)透(tou)析裝置。使用者也可(ke)以自(zi)行(xing)設計與(yu)制(zhi)作各種(zhong)簡(jian)易的透(tou)析裝置。美國生(sheng)物醫學公(gong)司（Biomed Instruments Inc.）生(sheng)產的各種(zhong)型號的Zeineh 透(tou)析器，由(you)於使用對(dui)流(liu)透(tou)析的原理，使透(tou)析速度和(he)效率大(da)大(da)提高。