VEPHOTON 疫(yi)熒光(guang)轉(zhuan)移(yi)標(biao)記(ji)試劑(ji)盒(he)——NF-KAPPA B (NF-KB) - P65 (RELA) IMMUNOFLUORESCENCE LABELING KIT (NF-KAPPAB, NFKB-3)

VEPHOTON 疫熒光(guang)轉(zhuan)移(yi)標(biao)記(ji)試劑(ji)盒(he)

• 提供(gong)NF-KPAPAB激(ji)活和P65轉位(wei)的視覺(jiao)演示(shi)。

• 提(ti)供匹(pi)配(pei)的主要(yao)設(she)備(bei)和2 ^O 熒光(guang)標(biao)記(ji)抗體(ti),在細(xi)胞(bao)核(he)和細(xi)胞(bao)質(zhi)中檢測p65。

• 適用於大部(bu)分(fen)哺(bu)乳動物細(xi)胞(bao)(例(li)如:人類,老鼠,老鼠,倉(cang)鼠,狗,兔子(zi),馬。

• 通過用像素(su)定(ding)量(liang)軟件(jian)測量(liang)P65的免疫(yi)熒光(guang)強(qiang)度,對(dui)NF-KB激(ji)活進(jin)行量(liang)化。*

• 在40個(ge)顯微(wei)鏡(jing)幻(huan)燈片(pian)上給(gei)p65貼(tie)上(shang)標(biao)簽(qian)的充分解決方(fang)案(an)。

背(bei)景(jing)

nf-kb復(fu)合體(ti)位(wei)於胞(bao)質中,處(chu)於(yu)非活性狀(zhuang)態(tai),由與P65-p50異(yi)二聚體(ti)組(zu)合的抑(yi)制性(xing)Ikb亞(ya)基組(zu)成。在刺激(ji)作(zuo)用(yong)下,IKB抑(yi)制子(zi)單元(yuan)被(bei)超基化和降(jiang)解,暴露(lu)在P65(RELA)子(zi)單元(yuan)上的核(he)定(ding)位(wei)信號(hao),然後(hou)轉(zhuan)移(yi)到(dao)原(yuan)子(zi)核(he)中。該試劑(ji)盒(he)提供(gong)的抗體(ti)用(yong)於(yu)標(biao)記(ji)細(xi)胞(bao)核(he)和胞質(zhi)中的p65。然(ran)後(hou)利(li)用(yong)熒光(guang)顯微(wei)鏡(jing)和像素(su)量(liang)化軟件(jian)來(lai)估計P65的發(fa)射(she)強(qiang)度。

細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)在玻璃蓋(gai)上(shang),約85%的共(gong)通性(xing),並(bing)處(chu)理(li)激(ji)活NF-KPAPAB。細(xi)胞(bao)蛋(dan)白首先是交(jiao)聯(lian)的,並(bing)固(gu)定(ding)與甲(jia)醛(quan)(未(wei)提(ti)供)。交聯(lian)反(fan)應(ying)用提供的淬(cui)火(huo)溶液進(jin)行淬(cui)火(huo)。血漿(jiang)和核(he)膜是滲(shen)透性(xing)提供的溶(rong)液,其(qi)中包(bao)括(kuo)滲(shen)透試劑(ji)和蛋白阻滯(zhi)劑(ji)。  壹個(ge)包(bao)括(kuo)的P65IGG抗體(ti),然(ran)後(hou)應(ying)用於細(xi)胞(bao)1小(xiao)時(shi)。未(wei)綁(bang)定(ding)抗體(ti)被(bei)洗去,並(bing)提供羅(luo)丹(dan)明(ming)標(biao)記(ji)的FAB片(pian)段二的抗體(ti)應(ying)用(yong)1小(xiao)時。未(wei)綁(bang)定(ding)的二次抗體(ti)被(bei)沖走,壹個(ge)由滑塊(kuai)和蓋片(pian)組(zu)成的三(san)明(ming)治,中間(jian)有(you)抗褪色溶(rong)液。安(an)蒂(di)法去溶液可以在壹夜(ye)之(zhi)間(jian)凝固(gu)。顯微(wei)鏡(jing)滑蓋(gai)滑塊(kuai)配(pei)置(zhi)現已(yi)準(zhun)備(bei)好(hao)用於(yu)視覺(jiao)和定(ding)量(liang)檢測P65易(yi)位(wei)。