jembio：DNA 連(lian)接(jie)酶(mei)（大腸(chang)桿(gan)菌(jun)）

jembio：DNA 連(lian)接(jie)酶(mei)（大腸(chang)桿(gan)菌(jun)）

DNA 連(lian)接(jie)酶(mei)（大腸(chang)桿(gan)菌(jun)）   DNA 連(lian)接(jie)酶(mei)（大腸(chang)桿(gan)菌(jun)）催(cui)化(hua)雙(shuang)鏈 DNA 中並(bing)置(zhi)的(de) 5' 磷(lin)酸鹽(yan)和(he) 3' 羥基(ji)粘(zhan)性末(mo)端(duan)之間(jian)磷酸二(er)酯鍵的(de)形(xing)成(cheng)。  

 描述：

 • 催化具(ju)有粘性末(mo)端(duan)的(de)雙(shuang)鏈DNA 片段之間(jian)磷酸二(er)酯鍵的(de)形(xing)成(cheng)。 

• 5'-磷(lin)酰基(ji)與(yu)相鄰(lin)的3'-羥基(ji)的(de)縮(suo)合與(yu)NAD+的水(shui)解(jie)相結合。

 • 適用(yong)於(yu)全(quan)長cDNA 的高(gao)效(xiao)克(ke)隆(1, 2)。 

單位定(ding)義：1 個(ge)單位定(ding)義為(wei) lambda DNA 的(de) Hind III 片段產生 50% 連(lian)接(jie)所需的(de)酶(mei)量。在(zai) 20 µl 檢測混合物(wu)中於(yu) 16°C 下孵(fu)育(yu)，DNA 末(mo)端(duan)濃度(du)為(wei) 0.02 µM (50 µg/ml)。  儲存條(tiao)件：儲存於(yu)-20oC。   反應(ying)緩(huan)沖(chong)液：30 mM Tris-HCl（22°C 時(shi) pH 8.0）、1 mM 二(er)硫蘇糖(tang)醇(chun)、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛(niu)血清白蛋白。 很佳連接(jie)溫(wen)度(du)為(wei) 16°C。   

儲存緩(huan)沖(chong)液：10 mM Tris-HCl（22°C 時(shi) pH 7.4）、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸銨(an)、1 mM 二(er)硫蘇糖(tang)醇(chun)和(he) 50% (v/v) 甘油(you)。   

質量控(kong)制(zhi)：所有制(zhi)劑均經過核酸內(nei)切酶(mei)和(he)核酸外(wai)切酶(mei)汙(wu)染(ran)活(huo)性測試，以(yi)及連(lian)接(jie)反應(ying)中(zhong)的(de)功能測試。 連(lian)接(jie)測定(ding)條(tiao)件(jian)：30 mM Tris-HCl（22°C 時(shi) pH 8.0）、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二(er)硫蘇糖(tang)醇(chun)、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛(niu)血清白蛋白和 lambda DNA 的 Hind III 片段。 16°C 孵育(yu) 30 分(fen)鐘。  

jembio：DNA 連接(jie)酶(mei)（大腸(chang)桿(gan)菌(jun)）