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大(da)鼠(shu)(Rat)晚(wan)期糖基化(hua)終末產(chan)物(AGEs)
發布時間:2012/4/12
點擊(ji)次(ci)數:534
本(ben)試(shi)劑(ji)盒只(zhi)能(neng)用於(yu)科(ke)學(xue)研(yan)究(jiu),不得用(yong)於(yu)醫(yi)學(xue)診(zhen)斷(duan)
大(da)鼠(shu)(Rat)晚(wan)期糖基化(hua)終末產(chan)物(AGEs)
ELISA檢(jian)測試劑(ji)盒
使(shi)用(yong)說明書(shu)http://www.chem17.com/st217887/erlist_613093.html
檢測原(yuan)理
試劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體壹步夾(jia)心(xin)法(fa)酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸附(fu)試驗(yan)(ELISA)。往(wang)預
先(xian)包(bao)被晚(wan)期糖基化(hua)終末產(chan)物(AGEs)抗(kang)體的包(bao)被微(wei)孔中(zhong),依(yi)次(ci)加入
標本(ben)、標準(zhun)品(pin)、HRP標記的(de)檢測抗(kang)體,經過溫育並*洗(xi)滌。用底物
TMB顯(xian)色(se),TMB在過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的催化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍色(se),並在酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)
轉化(hua)成zui終的黃色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)晚期糖基化(hua)終末產(chan)物
(AGEs)呈正(zheng)相關(guan)。用(yong)酶(mei)標儀(yi)在450nm 波(bo)長下(xia)測定吸(xi)光(guang)度(du)(OD 值),
計(ji)算(suan)樣品(pin)濃(nong)度(du)。
樣品(pin)收集、處理及保(bao)存方法(fa)
1. 血(xue)清(qing):使(shi)用(yong)不含(han)熱原(yuan)和(he)內(nei)毒素(su)的試(shi)管,操作(zuo)過(guo)程中(zhong)避(bi)免任(ren)何(he)細胞(bao)
刺激,收集血(xue)液後,3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘將(jiang)血(xue)清(qing)和(he)紅(hong)細胞(bao)迅速小心(xin)地(di)
分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang):EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心(xin)30 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上清(qing)液:3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘去除(chu)顆(ke)粒和(he)聚(ju)合(he)物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):將(jiang)組織(zhi)加入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽水(shui)搗碎。3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘
取上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存:如果樣本(ben)收(shou)集後不及(ji)時檢測,請按(an)壹次(ci)用量(liang)分裝(zhuang),凍存於(yu)
-20℃,避(bi)免(mian)反復凍融(rong),在室溫下(xia)解(jie)凍並確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍。
自(zi)備(bei)物品(pin)
1. 酶(mei)標儀(yi)(450nm)
2. 高(gao)精(jing)度(du)加樣器及槍(qiang)頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒(heng)溫箱(xiang)
操(cao)作註(zhu)意事(shi)項
1. 試(shi)劑(ji)盒保(bao)存在2-8℃,使(shi)用(yong)前室溫平衡(heng)20 分(fen)鐘。從(cong)冰箱(xiang)取出(chu)的
濃(nong)縮洗(xi)滌液會有(you)結(jie)晶(jing),這屬於(yu)正(zheng)常(chang)現象(xiang),水(shui)浴(yu)加熱使(shi)結(jie)晶(jing)*溶解(jie)http://www.chem17.com/st217887/erlist_613093.html
後(hou)再(zai)使(shi)用(yong)。