冰(bing)凍切(qie)片(pian)包埋(mai)劑(ji)及(ji)使(shi)用方(fang)法

上海(hai)寶葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限公(gong)司

冰凍切(qie)片(pian)包埋(mai)劑(ji)及(ji)使(shi)用方(fang)法

OCT 冰凍切(qie)片(pian)包埋(mai)劑(ji)是(shi)壹種聚乙(yi)二醇和聚乙(yi)烯醇的水(shui)溶(rong)性(xing)混(hun)合(he)物(wu)，目前已(yi)廣泛用於免疫(yi)組化(hua)實驗(yan)室中，

其用途(tu)是(shi)在冰(bing)凍切(qie)片(pian)時(shi)支(zhi)撐(cheng)組(zu)織(zhi)，以增(zeng)加(jia)組(zu)織(zhi)的連(lian)續性(xing)，減(jian)少皺(zhou)折(zhe)及(ji)碎裂。又因OCT 混(hun)合(he)物(wu)為(wei)水(shui)溶(rong)性(xing)，故(gu)

在漂(piao)片時(shi)可(ke)溶(rong)於水，所以在以後(hou)的(de)染色中不會(hui)增加背(bei)景(jing)染(ran)色。

利(li)用OCT 混(hun)合(he)物(wu)（opti-mum cutting temperature compound）預先浸(jin)潤組織(zhi)，然後(hou)再進(jin)行(xing)恒冷箱(xiang)切(qie)片(pian)，

使切(qie)片(pian)質量得到(dao)改(gai)善(shan)。

目前實(shi)驗室(shi)使(shi)用的冰(bing)凍切(qie)片(pian)包埋(mai)劑(ji)主流(liu)產品是(shi)日本(ben)櫻花(hua)公(gong)司的O.C.T. Compound ，貨號：4583，118ml/

瓶(ping)，質量穩(wen)定(ding)，研究(jiu)者比(bi)較熟(shu)習(xi)。

在使(shi)用OCT 進(jin)行(xing)包埋(mai)時(shi)，對(dui)於包埋(mai)模(mo)具而(er)言(yan)，您可(ke)以(yi)選擇(ze)廠(chang)家已有的產(chan)品，也可(ke)以(yi)根據(ju)實際(ji)條(tiao)件(jian)利(li)用手

邊已(yi)有的包埋(mai)管(guan)、包埋(mai)板(ban)等(deng)；也有心靈(ling)手巧的研究者(zhe)自(zi)己(ji)利(li)用銅(tong)版(ban)紙折(zhe)疊出(chu)很(hen)漂(piao)亮實用的OCT 包埋(mai)模(mo)具（當

然前(qian)提是(shi)您的(de)用量要(yao)少）。

OCT 包埋(mai)劑(ji)（SAKURA 產品）包埋(mai)流(liu)程(cheng):

1. 將放(fang)在蔗(zhe)糖(tang)溶(rong)液中的(de)組織(zhi)塊取(qu)出(chu)，放(fang)入(ru)20g L-1 蔗(zhe)糖(tang)與(yu)OCT 包埋(mai)劑(ji)1：1 體積比(bi)例(li)混(hun)合(he)液中(zhong)，室溫浸(jin)

泡2h

2. 移入(ru)OCT 包埋(mai)劑(ji)中(zhong)室溫(wen)浸(jin)泡4h，更(geng)換新(xin)的OCT 包埋(mai)劑(ji)，室(shi)溫浸(jin)泡6h.

3. 將標(biao)本置(zhi)於(yu)托(tuo)物(wu)臺(tai)，用恒冷(leng)箱(xiang)切(qie)片(pian)機切(qie)片(pian)（壹般(ban)-22℃），片厚10μm，貼於(yu)預處(chu)理的載(zai)玻(bo)片上，-20℃

冰箱(xiang)保存(cun)。

在實(shi)際工(gong)作(zuo)中(zhong)，有研究(jiu)者(zhe)發現(xian)當包埋(mai)的(de)樣(yang)本體積較大或者冰凍溫度(du)要(yao)求更(geng)低(di)壹點時(shi)，使(shi)用櫻花(hua)的(de)Oct（貨

號：4583）進(jin)行(xing)包埋(mai)往(wang)往(wang)很(hen)難(nan)取得理想的包埋(mai)結(jie)果(guo)。當您遇到(dao)這樣的麻(ma)煩時(shi)，我(wo)們建議(yi)您(nin)采(cai)用另外壹種Oc

t 包埋(mai)劑(ji)Tissue Freezing Medium，美(mei)國TBS 公司生(sheng)產（貨號：72592）。

如(ru)果(guo)該文(wen)對(dui)您(nin)的(de)學(xue)習(xi)和研究(jiu)能(neng)有絲(si)毫幫(bang)助(zhu)，我(wo)們都會(hui)備(bei)感欣(xin)慰