SDS-聚丙(bing)烯酰(xian)胺凝(ning)膠(jiao)電泳低分(fen)子(zi)量(liang)標(biao)準蛋(dan)白質(zhi)
本公司(si)研制(zhi)的SDS-聚(ju)丙(bing)烯酰(xian)胺凝(ning)膠(jiao)電泳低分(fen)子(zi)量(liang)標(biao)準蛋(dan)白質(zhi)，使用方(fang)便(bian)，效果尤(you)佳。其(qi)分(fen)子(zi)量(liang)範(fan)圍是(shi)14400～97400道爾(er)頓(dun)。
成分(fen)：
成分(fen) | 分(fen)子(zi)量(liang)（道爾(er)頓(dun)） | 含量(liang)（μg/支） |
兔(tu)磷酸化(hua)酶B/Rabit phosphorglase B | 97400 | 40 |
牛(niu)血清白蛋(dan)白/Bovine serum Albumin | 66200 | 40 |
兔(tu)肌(ji)動(dong)蛋(dan)白/Rabbit actin | 43000 | 40 |
牛(niu)碳酸酐(gan)/Bovine carbonic anhydrase | 31000 | 40 |
胰(yi)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制劑(ji)/Trypsin inhibitor | 20100 | 40 |
雞(ji)蛋(dan)清(qing)溶菌酶/Hen egg white lysozyme | 14400 | 40 |
本產品(pin)規(gui)格(ge)：凍(dong)幹粉(fen)（20次/支）
使用方(fang)法(fa)：
1、 將(jiang)凍(dong)幹粉(fen)產品(pin)先(xian)加(jia)200ul重(zhong)蒸(zheng)水(shui)溶解(jie)，再(zai)加(jia)等(deng)體積(ji)的(de)2倍(bei)樣品緩(huan)沖液(ye)混勻。在沸(fei)水(shui)浴(yu)中變(bian)性(xing)3-5分(fen)鐘(zhong)，分(fen)裝20ul/支，入(ru)-20℃保(bao)存(cun)。使用時取(qu)壹(yi)支即(ji)可(ke)上(shang)樣。
2、 應經常(chang)規(gui)SDS-PAGE電(dian)泳(yong)後，用考(kao)馬(ma)斯亮藍(lan)R-250或G-250（coomassie blue R-250 or G250）染(ran)色(se)。可(ke)得分(fen)布均勻、密度(du)相(xiang)同(tong)的6個(ge)蛋(dan)白質(zhi)條(tiao)帶
3、 銀(yin)染(ran)法(fa)：將(jiang)本品以(yi)1倍(bei)樣品緩(huan)沖液(ye)稀釋40-50倍(bei)後分(fen)裝（8ul/支）、-20℃保(bao)存(cun)。使用前(qian)取壹(yi)支，100℃水(shui)浴(yu)3-5分(fen)鐘(zhong)即(ji)可(ke)上(shang)樣。經常(chang)規(gui)SDS-PAGE後銀(yin)染(ran)，可(ke)得分(fen)布均勻的6個(ge)蛋(dan)白質(zhi)條(tiao)帶。
建議使用分(fen)離膠(jiao)：14%（T）。
表-2倍(bei)樣品緩(huan)沖液(ye)配制：
試(shi)劑(ji)名(ming)稱(cheng) | 成分(fen) | 含量(liang)/濃(nong)度(du) | 配制方法(fa) |
2倍(bei)樣品 緩(huan)沖液(ye) | 0.5M Tris-HCI,PH6.8 | 2.0ml | 以(yi)上(shang)溶(rong)液混合後加雙蒸(zheng)水(shui)2.5ml至10.0ml，可(ke)適(shi)當(dang)調整(zheng)溴酚藍(lan)的用量(liang)以(yi)保(bao)證(zheng)電泳(yong)時的(de)*指(zhi)示 |
丙(bing)三醇（甘油(you)） | 2.0ml |
20%SDS | 2.0ml |
0.1%（w/v）溴酚藍(lan) | 0.5ml |
2-b-巰基(ji)乙(yi)醇 | 1.0ml |
Reagents for SDS Gels
A. 4×Lower gel buffer pH8.8
1.5M Tris 90.83g
0.4%（w/v）SDS 2.00g
dd H2O to 500ml
用濃(nong)HC1調(tiao)PH至8.8
B. 4×Upper gel buffer pH6.8
0.5M Tris 12.11g
0.4%（w/v）SDS 0.8g
dd H2O to 200ml
用濃(nong)HC1調(tiao)PH至6.8
C. 30% Acrylamide regular
29.2%（w/v）acrylamide 29.2g
0.8%（w/v）Bis-acrylamide 0.8g
dd H2O to 100ml
加(jia)熱使acrylamide*溶(rong)解，冷卻後加Bis混合溶(rong)解後定容(rong)，用濾(lv)紙(zhi)過濾(lv)，裝棕(zong)色(se)瓶
D. 10×Running buffer
0.25M Tris 30.3g
1.92M Gly 144.1g
1.0%（w/v）SDS 10.0g
dd H2O to 100ml
（無需(xu)調(tiao)PH）PH即(ji)為(wei)8.2-8.3
分(fen)離膠(jiao) 總體積(ji)12ml 單(dan)位：ml 濃縮膠
| 5% | 7% | 10% | 11.5% | 12% | 13.5% | 14% | 15% | 5% | |
dd H2O | 7 | 6.2 | 5 | 4.4 | 4.2 | 3.6 | 3.4 | 3 | dd H2O | 4.06 |
4×lower | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 4×Up | 1.68 |
30%Acr | 2 | 2.8 | 4 | 4.6 | 4.8 | 5.4 | 5.6 | 6 | 30%Acr | 1 |
100%TEMED | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 10ul | 100%TEMED | 5ul |
10%AP | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul | 10%AP | 50ul |
附(fu)圖壹(yi)：SDS-PAGE 低分(fen)子(zi)量(liang)標(biao)準蛋(dan)白質(zhi)考(kao)馬(ma)斯亮藍(lan)R-250染(ran)色(se)結(jie)果(guo)
兔(tu)磷酸化(hua)酶B 97400道爾(er)頓(dun)
牛血清白蛋(dan)白 66200道爾(er)頓(dun)
兔(tu)肌(ji)動(dong)蛋(dan)白 43000道爾(er)頓(dun)
牛碳(tan)酸酐(gan) 31000道爾(er)頓(dun)
胰(yi)蛋(dan)白酶(mei)抑(yi)制劑(ji) 20100道爾(er)頓(dun)
雞蛋(dan)清(qing)溶菌 14400道爾(er)頓(dun)
當(dang)前(qian)位置：首頁
技術文(wen)章(zhang)
更新(xin)時間：2024-02-19
點擊(ji)次(ci)數：2395
